免疫組化（IHC）是靶向治療中的常見伴隨診斷，在時間和成本效益方面優(yōu)于其他檢測技術。在某些情況下，免疫組化和突變特異性抗體甚至可以成為DNA檢測方法的有力替代方案。

伴隨診斷最早是在腫瘤學領域引入的。為了幫助醫(yī)生確定某種靶向療法是否適合某個患者，需要使用伴隨診斷。

伴隨診斷是一種用于預測性生物標志物的檢測，可將患者分為對特定治療藥物有反應者和無反應者。同時，伴隨診斷被FDA和NMPA認定為三類醫(yī)療器械（少數(shù)被FDA歸為二類），其檢測結果直接關系到藥物的使用。

1998年，F(xiàn)DA批準了第一個伴隨診斷產(chǎn)品HercepTest，成為免疫組化（IHC）作為伴隨診斷的原型。隨著藥物-診斷聯(lián)合開發(fā)模式的引入，監(jiān)管機構批準的免疫組化伴隨診斷產(chǎn)品數(shù)量一直在穩(wěn)步增加，涉及的生物標志物包括：，MET，ALK，PD-L1，HER2等。

免疫組化，全稱為免疫組織化學染色，其核心原理是利用抗原與抗體特異性結合的特性，用帶有標記的抗體去識別特定蛋白質(zhì)。其中，一抗是與特定蛋白質(zhì)靶點/抗原結合牢固的抗體，可以直接標記，但為了提高靈敏度，它們通常與二抗一起使用（二抗與酶結合，與顯色劑或熒光分子反應，使它們沉積在組織上，從而提高靈敏度）。 ▲ 免疫組化工作流程：I. 組織收集；II. 固定；III. 包埋；IV. 切片；V. 貼片；VI.抗原修復和封閉；VII. 一抗反應；VIII. 標記二抗反應；IX. 染色和復染

今天，我們來介紹下 MET蛋白 這個免疫組化伴隨診斷生物標志物，它是非小細胞肺癌（NSCLC）推薦檢測的生物標志物。

▲ 非鱗狀NSCLC MET蛋白檢測必要性

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MET生物學特性

MET基因為原癌基因，編碼c-MET蛋白，屬于酪氨酸受體激酶，包括胞外、跨膜和胞內(nèi)3個區(qū)域，胞外主要與受體（肝細胞生長因子，HGF）結合，胞內(nèi)主要激活下游信號（如PI3K-AKT、RAS-MAPK等）。

▲ MET蛋白結構

MET異常變異包括：METex14跳突、MET基因擴增、MET基因點突變（主要是激酶結構域突變）、MET基因融合及MET蛋白過表達等，其異常變異后會導致MET信號通路的異常激活，進而驅(qū)動惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。

在NSCLC中，臨床最關注的還是METex14跳突（卡馬替尼、特泊替尼、賽沃替尼、谷美替尼、伯瑞替尼）、MET基因擴增（伯瑞替尼，賽沃替尼+奧希替尼）和MET蛋白過表達（telisotuzumab vedotin-tllv），這些變異形式均已通過臨床研究獲得了相應適應癥的批準。

▲ NSCLC中MET通路異常激活的三種重要形式及致癌機制

今天，我們重點介紹MET蛋白過表達，它是需要IHC方法檢測的生物標志物，也是MET變異中發(fā)生頻率最高的（也是EGFR-TKI耐藥機制之一）。MET蛋白過表達會促使細胞膜表面MET受體增加，HGF敏感性增加，導致MET通路的異?；罨?/p>

▲ NSCLC中MET蛋白過表達的生物學功能

關于MET蛋白過表達，可能由多種原因造成，其中包括：

（1）其他致癌驅(qū)動基因的激活：如EGFR，KRAS等基因激活后的二次事件發(fā)生。

（2）缺氧環(huán)境：激活缺氧誘導因子1α等，上調(diào)MET基因轉(zhuǎn)錄水平，導致MET蛋白過表達。

（3）炎癥因子：激活核基因κB等信號通路，上調(diào)MET基因的表達。

（4）促血管生成因子：激活相關信號通路，上調(diào)MET蛋白的表達。

（5）HGF：HGF在腫瘤微環(huán)境中異常高表達，持續(xù)激活MET受體，導致MET蛋白過表達。

（6）MET基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控異常。

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MET蛋白過表達流行病學

在不同地區(qū)的NSCLC患者中，MET蛋白過表達的總體發(fā)生率呈現(xiàn)出較大差異，中國人群為17.5%-63.7%，西方人群為35%-72%，EGFR-TKIs經(jīng)治的EGFR突變晚期NSCLC患者中MET蛋白過表達的發(fā)生率為30.4%-37.0%。

值得注意的是，MET蛋白過表達與METex14跳突和MET基因擴增的相關性差異較大（與METex14跳突相關性較低，與MET基因擴增相關性1%-80%）。因此，應單獨進行MET蛋白的檢測。

▲ NSCLC中MET蛋白過表達與跳突和擴增的比例和關系

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MET蛋白過表達靶向藥物

2025年5月14日，美國FDA加速批準艾伯維的telisotuzumab vedotin-tllv（Emrelis，維汀-特立妥珠單抗）用于治療既往已接受過全身系統(tǒng)治療且高水平c-MET蛋白過表達（高表達，≥50%的腫瘤細胞具有IHC 3+膜和/或胞質(zhì)染色）的局部晚期或轉(zhuǎn)移性非鱗狀NSCLC。這是首個被批準用于MET蛋白過表達的靶向藥物：靶向MET蛋白的ADC。

▲ FDA批準首個MET蛋白過表達靶向藥物上市

支持該藥物獲批的關鍵臨床試驗LUMINOSITY研究顯示：既往接受過系統(tǒng)治療的84例EGFR野生型且高水平MET蛋白過表達的非鱗狀NSCLC患者，總體緩解率（ORR）為35%，中位持續(xù)緩解時間（DOR）為7.2個月。

值得注意的是，此次臨床試驗僅納入了EGFR野生型患者，并未納入EGFR突變型患者，但FDA批準的時候未特別強調(diào)必須EGFR野生型才能使用（只重點看MET高表達，不看EGFR狀態(tài)）。最新NSCLC NCCN指南在推薦telisotuzumab vedotin-tllv使用的時候需要MET蛋白表達 IHC 3+≥50%且EGFR野生型。

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MET蛋白過表達伴隨診斷

VENTANA MET (SP44) RxDx Assay的定性IHC檢測試劑已在美國獲批為telisotuzumab vedotin-tllv的伴隨診斷，以幫助檢測非鱗狀NSCLC患者中的MET蛋白高表達，篩選符合接受治療的患者。

VENTANA MET (SP44) RxDx Assay試劑盒是一種兔單克隆一抗，可與FFPE切片樣本中的MET蛋白結合，并與OptiView DAB IHC檢測試劑盒聯(lián)合使用（顯色），該檢測在BenchMark Ultra或BenchMark Ultra Plus全自動免疫組化染色機上進行檢測。MET高表達定義為≥50%的腫瘤細胞具有IHC 3+膜和/或胞質(zhì)染色。

LUMINOSITY研究對≥25%且＜50%的腫瘤細胞IHC 3+強著色定義為中表達。

臨床判讀采用Clinical Score標準，此標準是將染色強度與腫瘤細胞陽性比例相結合，從而完成MET IHC評分，陽性閾值為50%。

值得注意的是，F(xiàn)DA要求對VENTANA MET (SP44) RxDx Assay試劑盒進行上市后監(jiān)測研究（也稱批準后研究，簡稱PAS）。這種情況一般是FDA不確定器械的特定受益或風險，但是在上市前批準、器械總體受益-風險概況的背景下不確定度可以接受時，可以接受在上市后環(huán)境（而非上市前）中收集特定數(shù)據(jù)，以處理關于批準的醫(yī)療器械上市后性能或經(jīng)驗的問題。

如果FDA確定申請方不符合PAS要求，在特定情況下可以撤回對PMA的批準。在此階段，無法在FDA官網(wǎng)的伴隨診斷設備界面進行查詢。

▲ 5月14日 PMA批準上市，但需要做PAS研究

▲ 7月11日 批準臨床方案《通過不同細胞成分對VENTANA MET (SP44) RxDx檢測的流行病學和療效評估》，用于批準后研究（PAS）方案

當前國內(nèi)外范圍內(nèi)，已有多個檢測MET蛋白過表達的抗體產(chǎn)品獲準醫(yī)療器械注冊或備案，這些抗體涵蓋多個克隆號（如SP44、cMET、MET4和AF276等）。仍建議使用循證醫(yī)學證據(jù)充足的IHC檢測平臺、抗MET抗體和二抗檢測試劑，確保其臨床有效性。

在國內(nèi)，尚未有伴隨診斷產(chǎn)品獲批的情況下，或伴隨診斷獲批了但實際應用受醫(yī)保和臨床實踐影響較大的情況下，通常，也可以依賴于整個病理學界的質(zhì)量保證測試從而進行選擇，比如病理實驗室資質(zhì)，病理室間質(zhì)評等。

▲ NSCLC MET IHC染色強度和評分標準

▲ NSCLC MET IHC染色結果

綜合而言，telisotuzumab vedotin-tllv（維汀-特立妥珠單抗）的獲批為MET蛋白高表達的NSCLC患者群體引入了一種新的生物標志物和靶向治療，中國人群比例高達17.5%-63.7%。臨床應關注MET蛋白高表達的檢測，NSCLC NCCN指南建議在疾病進展期間進行MET免疫組化檢測；《非小細胞肺癌MET免疫組織化學檢測和判讀標準中國專家共識（2023版）》和《MET異常NSCLC診療專家共識（2025版）》建議晚期初治和EGFR-TKIs耐藥后NSCLC患者推薦使用IHC進行MET蛋白過表達檢測。

參考資料：

1.https://www.fda.gov/drugs/resources-information-approved-drugs/fda-grants-accelerated-approval-telisotuzumab-vedotin-tllv-nsclc-high-c-met-protein-overexpression

2.https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfpma/pma.cfm?id=P240037

3.中華醫(yī)學會病理學分會, 國家病理質(zhì)控中心, 中華醫(yī)學會腫瘤學分會肺癌學組, 等. 非小細胞肺癌 MET 臨床檢測中國專家共識 [J]. 中華病理學雜志,2022,51(11):1094-1103.

4.MET免疫組織化學標準化判讀專家委員會 中國抗癌協(xié)會腫瘤病理專業(yè)委員會分子病理協(xié)作組. 非小細胞肺癌MET免疫組織化學檢測和判讀標準中國專家共識（2023版）[J]. 中華病理學雜志, 2023, 52(11): 1090-1097.

5.陳軍, 韓寶惠, 胡毅, 等. MET異常NSCLC診療專家共識（2025 版）[J/OL]. 中國肺癌雜志,1-13.