生物實驗室里一直流傳著一些規(guī)則怪談:
如果超凈工作臺的紫色燈亮起,一定要等 30 min 后才能使用,不然會有不好的事情發(fā)生;
混勻細胞時必須按照規(guī)定儀式:上下晃 10 下,左右晃 10 下……
這些規(guī)則怪談雖然看起來詭異,但放在生物實驗室倒也正常,細究下去,每一條規(guī)則背后可能都是血的教訓。
但是其中有一條,最近引起了一些爭議
——移液器使用完畢后,到底要不要調(diào)回最大量程?
* 想直接看結(jié)果可拉到文末看省流版
圖源:網(wǎng)絡
竟是只有中國人遵守的規(guī)定?
這個問題的答案,對于國產(chǎn)科研人來說,早已刻進 DNA 里,畢竟師兄師姐耳提面命那么多次——
移液器調(diào)回最大量程使彈簧不受力,保護移液器。
事實真的如此嗎?
圖源:小紅書
最近中外科研人在小紅書一對賬發(fā)現(xiàn),這個要求怎么好像是中國科研人特供版???
這還了得??
你跟生物科研人說移液器不用調(diào)回最大量程,不亞于告訴大家,1+1,其實可以不等于 2。
學霸君搜索發(fā)現(xiàn),其實這個話題在近 10 年間其實一直不斷被提及,但大家一直也沒有吵出個頭緒。
不過這條規(guī)定倒也確實不是「國人特供版」,因為在國外的論壇上也討論得火熱,一些實驗室當作不可違背的金科玉律,有些則完全不在意:
圖源:reddit
圖源:Research Gate
兩邊觀點
支持的人分為 3 派:
有人認為,盡管移液器量程的精確度不直接由彈簧控制,但是如果不調(diào)回最大量程,彈簧就會一直處于壓縮狀態(tài),長期的應力會使彈簧發(fā)生蠕變,回彈不到原始長度。
這時按壓時就會出現(xiàn)無法回彈或者回彈不夠絲滑的情況,就會影響移液的精度。
還有人認為,移液器使用時如果有操作不當吸入大量液體,使用后將移液器垂直放置,并將量程調(diào)至最大,這時彈簧放松,腔體內(nèi)壓力較小,液體容易流出。
這兩種支持的觀點有一個共同的前提——
在移液器處于最大量程時,彈簧處于不受應力松弛狀態(tài)。
還有人這樣認為,如果大家都保持移液器調(diào)至最大量程的規(guī)范,可以一定程度上避免下一個使用的人直接使用出現(xiàn)失誤。
而反對的觀點則認為:
并沒有研究表明不調(diào)回最大量程會影響移液器的精準度,真正能保證移液器精準度的操作應該是定期校準移液器,比如半年一次。
過于頻繁地調(diào)整移液器的量程,反而才是減少移液器的使用壽命。
真相如何?
為了解答這個疑惑,學霸君查閱了各大移液器品牌手冊,并咨詢了技術(shù)人員。
結(jié)論是:因「槍」而異!
比如發(fā)明了「可調(diào)移液器」的經(jīng)典老牌 Gilson,它家的移液器使用后是需要調(diào)回最大量程的。
因為 Gilson 的移液器就是上文提到的情況,它的彈簧在最大量程時是處于非壓縮狀態(tài),時常調(diào)回可以延長彈簧的使用壽命。
這一點 Gilson 的官方人員也給出確認:
但相反,以電動移液器見長的德國公司 Sartorius,它家的手動移液器是無需調(diào)回最大量程的。
因為不同于目前市面上的大部分移液器使用的壓縮彈簧,Sartorius 的移液器使用的是張力彈簧設計。
這樣的設計使得移液器在調(diào)節(jié)量程時始終處于不受力的狀態(tài),只有當操作時,按下活塞,彈簧才拉伸,松開活塞,彈簧便復原,因此不用通過調(diào)回最大量程來保護彈簧。
圖源:Sartorius 官網(wǎng)
還有造出世界上第一支移液器的知名移液器品牌 eppendorf,其說明書中并沒有寫在不用時需要將量程調(diào)至最大。
圖源:eppendorf官網(wǎng)
為此學霸君聯(lián)系了 eppendof 官方技術(shù)人員,對方表示 eppendof 現(xiàn)在的移液器不需要在不使用時調(diào)回最大。
之前之所以會有這樣的規(guī)定,是因為 20 年前的彈簧材料工藝就是比較容易疲勞,需要調(diào)節(jié)至最大量程釋放壓力。
但現(xiàn)在使用的彈簧材料已經(jīng)大大進步,于是去除了這一項提示,并且 eppendof 移液器中的彈簧在調(diào)回最大量程時也并不是處于完全松弛狀態(tài)的,所以如果是出于保護彈簧考慮,無需將移液器調(diào)整至最大量程。
圖源:eppendorf 官網(wǎng)
同樣不用調(diào)回最大量程的還有知名移液器品牌普蘭德(Brand),官方技術(shù)人員告訴學霸君,他們的彈簧已經(jīng)迭代,使用后無需調(diào)回。
圖源:自己截的
也有網(wǎng)友分享了康寧(Corning)移液器的使用經(jīng)驗,同樣是不需要調(diào)回最大量程的。
技術(shù)人員表示,移液器的彈簧只是在按壓的時候才處在受壓狀態(tài),負責精準度的是校準螺絲。簡而言之,就是對于康寧移液器來說,不用時調(diào)節(jié)到最大量程并不是必要步驟。
圖源:小紅書
還有一個移液器大廠 Thermo Scientific,它們的移液器用戶手冊中也沒有要求調(diào)回最大量程。
不過學霸君也同時咨詢了 Thermo Scientific 的技術(shù)人員,這次 Thermo Scientific 的技術(shù)人員告訴學霸君,還是建議用戶在不使用時,最好將移液器調(diào)至最大量程。
還有咱們熟悉的移液器品牌瑞寧(Rainin),它家的技術(shù)人員同樣是建議調(diào)回最大量程,因為里面的彈簧在一直被壓縮的狀態(tài),是會影響準確性的。
除此之外,還有一個必須要調(diào)回最大量程的,是我們熟悉的國產(chǎn)扛把子——大龍,這條規(guī)定是直接寫進說明書的。
圖源:大龍官網(wǎng)
省流版:
如果是出于實驗室標準化操作(避免更多失誤),那使用完畢調(diào)回最大量程無可厚非,如果是出于延長移液器使用壽命,則根據(jù)不同移液器有不同的要求。
比糾結(jié)「調(diào)回最大量程」更重要的事!
不過在學霸君對各品牌移液器進行一番狠狠科研后發(fā)現(xiàn),所有品牌的說明書都不約而同地強調(diào)了一條至關(guān)重要的規(guī)則:
——不使用時一定要垂直放置!??!
垂直放置一來是使誤吸的液體可以在重力作用下流出,避免腐蝕槍體內(nèi)部,而且如果不垂直放置,移液器的活塞可能會松動甚至脫離,影響精度。
同時,對移液器精準度影響更大的因素是,定期校準,建議至少每半年安排一次。
總之善待移液器,它好,我們才能好。
參考資料:
1.https://www.gilsoncn.com/guide-to-pipeting
2.https://www.hawachlab.com/news/pipette-adjust-to-maximum/#:~:text=Because%20the%20spring%20in%20the,lose%20its%20ability%20to%20rebound.
3.https://www.reddit.com/r/labrats/comments/1izi5lf/how_to_fix_overtwisted_eppendorf_research_plus/
4.https://www.researchgate.net/post/Is_it_necessary_to_reset_micropipettes_to_their_maximum_volume
5.https://www.eppendorf.com/product-media/doc/en/327080/Eppendorf_Liquid-Handling_Adjustment_Research-plus_Factory-Adjustment_Eppendorf-Research-plus-Factory-Adjustment
6.https://www.dlabsci.cn/index.htm
題圖來源:圖蟲創(chuàng)意
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