【寫在前面】：本期推薦的是由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院同濟(jì)醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合研究所、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院同濟(jì)醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科等研究團(tuán)隊合作近期發(fā)表于Journal of Ethnopharmacology(IF5.4）的一篇文章，揭示補(bǔ)腎活血方通過調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號改善卵巢早衰小鼠顆粒細(xì)胞鐵死亡和凋亡。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Integrating network pharmacology and transcriptomics reveals that Bushen Huoxue recipe ameliorates ferroptosis and apoptosis in granulosa cells by regulating PI3K/Akt signaling pathway in premature ovarian insufficiency mice

背景

補(bǔ)腎活血方，取自《景岳全書》記載，常用于治療月經(jīng)不調(diào)、卵巢早衰和不孕。BHR已被證明在改善卵巢功能方面具有極好的療效。然而，核心機(jī)制尚未得到充分澄清。

目的

本研究旨在探討B(tài)HR對環(huán)磷酰胺（CTX）誘導(dǎo)的小鼠POI的影響，并確定其作用機(jī)制。

方法

CTX給藥誘導(dǎo)POI小鼠模型的建立。不同組的小鼠分別服用蒸餾水、BHR和脫氫表雄酮28天。根據(jù)卵巢指數(shù)、動情周期、卵巢形態(tài)、卵泡發(fā)育和激素水平評估卵巢功能。Tunel檢測和流式細(xì)胞術(shù)用于評估細(xì)胞凋亡。Western blotting和q-PCR用于檢測與鐵死亡和凋亡相關(guān)的分子。將網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與轉(zhuǎn)錄組分析相結(jié)合的綜合方法闡明了治療靶點，隨后通過分子技術(shù)和細(xì)胞檢測進(jìn)行了驗證。

結(jié)果

BHR給藥有效改善了POI小鼠的動情周期不規(guī)則、激素失衡、卵泡發(fā)育障礙、卵泡閉鎖增加和卵巢儲備減少。轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析表明，BHR可能通過抑制鐵死亡來增強(qiáng)POI小鼠的卵巢功能。在BHR給藥后，觀察到血紅素加氧酶1（Homx1）受到顯著抑制，同時谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）和溶質(zhì)載體家族7a成員11（SLC7A11）的表達(dá)增加。同時，BHR給藥有效地減輕了顆粒細(xì)胞（GC）的氧化應(yīng)激障礙。此外，BHR有效地抑制了GC的凋亡。根據(jù)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，BHR對POI的有益作用可能是由于PI3K/Akt通路，這證實了之前的結(jié)果。此外，我們通過體外實驗驗證了這一結(jié)論。

結(jié)論

BHR通過抑制GC的鐵死亡和凋亡，有效改善了CTX誘導(dǎo)的POI小鼠的卵巢功能。這種效應(yīng)是由PI3K/Akt信號通路的激活機(jī)制介導(dǎo)的。此外，Hmox1/GPX4軸可能與BHR介導(dǎo)的鐵死亡抑制有關(guān)。

圖文摘要

【前言】

在中醫(yī)中，POI根據(jù)癥狀分為“月經(jīng)減少”、“閉經(jīng)”或“不孕”。腎虛血瘀已被確定為這種疾病的主要病理機(jī)制。在治療上，補(bǔ)腎活血療法是POI的主要策略。補(bǔ)腎活血方是婦科調(diào)理的常用方劑，由地黃等十種草藥組成。眾多研究已證實，BHR不僅能有效維持性激素平衡，促進(jìn)卵泡生長和卵巢儲備，而且對POI癥狀有益，并提高妊娠率?？寡趸瘧?yīng)激、調(diào)節(jié)免疫功能以及促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖和遷移都可能導(dǎo)致這些結(jié)果。然而，由于中醫(yī)中存在多個環(huán)節(jié)、途徑和靶點，BHR介導(dǎo)的POI治療作用的潛在機(jī)制，特別是其對GC的調(diào)節(jié)作用，仍然沒有得到完全表征。因此，本研究旨在評估BHR在調(diào)節(jié)POI內(nèi)GC功能方面的療效和分子基礎(chǔ)。

本研究采用系統(tǒng)的體內(nèi)評估來評估BHR對卵巢GC功能的治療影響。隨后，結(jié)合綜合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，描繪了中藥中的多組分網(wǎng)絡(luò)相互作用。最后，通過分子生物學(xué)實驗和細(xì)胞實驗進(jìn)行了進(jìn)一步的驗證。綜上所述，本研究整合了動物和細(xì)胞實驗、生物信息學(xué)、組學(xué)和分子生物學(xué)，闡明了BHR對POI小鼠卵巢GC的治療效果，并為中藥方劑的研究提出了思路。

【結(jié)果部分】

1.BHR改善POI小鼠的卵巢指數(shù)、發(fā)情周期、卵泡發(fā)育和激素調(diào)節(jié)。

2.BHR減輕POI小鼠卵巢細(xì)胞凋亡。

3.BHR在體外促進(jìn)顆粒細(xì)胞的增殖并抑制其凋亡。

4.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測POI中BHR的信號通路。

5.轉(zhuǎn)錄組分析揭示了BHR對卵巢凋亡和鐵死亡抑制作用所涉及的信號通路。

6.BHR影響POI小鼠卵巢中鐵死亡相關(guān)基因的表達(dá)。

7.BHR抑制體外顆粒細(xì)胞的鐵死亡。

8.BHR在體內(nèi)和體外激活PI3K/Akt信號通路。

9.BHR通過激活PI3K/Akt信號通路抑制顆粒細(xì)胞的鐵死亡和凋亡。

10.BHR給藥對環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的POI小鼠顆粒細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用及潛在機(jī)制。BHR通過激活PI3K/Akt信號通路，抑制顆粒細(xì)胞的鐵死亡和凋亡，同時促進(jìn)細(xì)胞增殖，從而改善卵巢功能。BHR給藥后，Hmox1、Bax和裂解caspase 3的水平降低，而SLC7A11、GPX4、PCNA和Bcl2的水平升高。

【結(jié)論與討論】

綜上所述，這項研究表明，BHR給藥有效地改善了CTX誘導(dǎo)的POI小鼠的卵巢功能，這可以從激素失衡的改善、卵泡發(fā)育的穩(wěn)定、卵泡閉鎖的抑制和卵巢儲備的增強(qiáng)中得到證明。BHR治療顯著減輕了氧化應(yīng)激失衡，同時抑制了GC的鐵下垂和凋亡，同時增強(qiáng)了GC的增殖。這些保護(hù)作用是通過激活PI3K/Akt信號通路機(jī)制介導(dǎo)的（圖10）。此外，Hmox1/GPX4軸可能與BHR介導(dǎo)的鐵下垂抑制有關(guān)。這些發(fā)現(xiàn)闡明了BHR治療效果的分子基礎(chǔ)，為其在POI中的臨床應(yīng)用提供了科學(xué)見解。此外，本研究將傳統(tǒng)草藥與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)范式聯(lián)系起來，不僅為中醫(yī)藥的循證研究提供了參考，也有助于促進(jìn)全球?qū)χ兴幹苿┋熜У倪M(jìn)一步認(rèn)識。

注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！

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