近年來(lái),數(shù)字 PCR(ddPCR)技術(shù)因其高靈敏度和低樣本消耗的特點(diǎn),在各研究領(lǐng)域顯示出顯著優(yōu)勢(shì)。ddPCR 不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實(shí)現(xiàn)絕對(duì)定量,被認(rèn)為是重大突破。這歸功于 ddPCR 在科研研究中的關(guān)鍵作用。最近兩項(xiàng)重磅成果中,ddPCR 成為驗(yàn)證研究結(jié)果的關(guān)鍵工具:
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發(fā)表在 Science 的研究利用 ddPCR 技術(shù),通過(guò)精確檢測(cè)孕婦血小板中的胎兒性別決定基因 SRY,證實(shí)了 ddPCR 在定量檢測(cè)特定 DNA 序列方面的高靈敏度和精確度 [1]。
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由浙江大學(xué)、同濟(jì)大學(xué)和西湖大學(xué)聯(lián)合團(tuán)隊(duì)在 Nature Cancer 發(fā)表的研究通過(guò) ddPCR 技術(shù),能夠精確測(cè)量患者外周血中 CAR - NK 細(xì)胞的數(shù)量和 CAR 基因的拷貝數(shù) [2]。
ddPCR 技術(shù)具體如何操作?怎么融入課題?在您的研究領(lǐng)域中帶來(lái)了哪些具體的突破?為了進(jìn)一步探討 ddPCR 技術(shù)的最新進(jìn)展和應(yīng)用,Bio-Rad 將舉辦一場(chǎng)專注于 ddPCR 的國(guó)際研討會(huì),橫跨從分子領(lǐng)域到生物制藥的各個(gè)領(lǐng)域,屆時(shí)將有眾多科研精英分享他們的研究成果和經(jīng)驗(yàn)。
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ddPCR 技術(shù)之所以受到科研人員的青睞,主要得益于以下幾個(gè)優(yōu)勢(shì):
高靈敏度:ddPCR 能夠檢測(cè)到的最低目標(biāo)分子濃度通常在每微升 10^-18 摩爾的范圍內(nèi),這相當(dāng)于單個(gè)拷貝的 DNA 分子。
高精確度:ddPCR 的絕對(duì)定量精度可以達(dá)到 5~10% 的變異系數(shù)(CV),這比傳統(tǒng) PCR 的相對(duì)定量方法(通常 CV 在 10~20%)要精確得多。
操作簡(jiǎn)便:雖然操作簡(jiǎn)便性難以直接量化,但 ddPCR 的設(shè)計(jì)減少了對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員技能的依賴,因?yàn)樗鼫p少了人為操作步驟,如設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而降低了實(shí)驗(yàn)誤差的可能性。
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內(nèi)容策劃:沈佳鈺
內(nèi)容審核:周育紅
題圖來(lái)源:圖蟲(chóng)創(chuàng)意
參考文獻(xiàn)
[1]. Murphy L, Inchauspé J, Valenzano G, et al. Platelets sequester extracellular DNA, capturing tumor-derived and free fetal DNA. Science. 2025 Aug 14;389(6761):eadp3971.
[2]. Lei, W., Liu, H., Deng, W. et al. Safety and feasibility of 4-1BB co-stimulated CD19-specific CAR-NK cell therapy in refractory/relapsed large B cell lymphoma: a phase 1 trial. Nat Cancer 6, 786–800 (2025).
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