科技發(fā)展的齒輪正在高速運轉(zhuǎn)，每隔2-3年就會出現(xiàn)一個重大的技術(shù)變革引領(lǐng)生命科學走向更精細、更微觀、更真實的水平，這其中也包括蛋白的研究。默克生命科學作為Duolink技術(shù)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，具有品牌知名度、產(chǎn)品質(zhì)量、技術(shù)支持、客戶服務(wù)和創(chuàng)新能力等多方面的優(yōu)勢。

說起蛋白互作的研究方法，你會想到什么？

酵母雙雜交，免疫共沉淀和pull-down是最常用的蛋白互作實驗方法。雖然有多種實驗技術(shù)，但研究蛋白互作的科學家還是會被三個問題困擾：

1.實驗結(jié)果是否能真實反映勝利水平的蛋白互作情況? 而不是體外條件下產(chǎn)生的假陽性結(jié)果

2.實驗結(jié)果是否能檢測微量的蛋白互作? 無論是微量蛋白樣本還是轉(zhuǎn)瞬即逝的短暫結(jié)合，都極富挑戰(zhàn)

3.這幾種手段的結(jié)果都是不可視的，我們不能看到細胞層面蛋白互作的分布和強度

是時候跟上蛋白研究技術(shù)變革的腳步，找到合適的新方法了！這些問題都隨著Duolink? PLA技術(shù)的出現(xiàn)迎刃而解！

Duolink?采用PLA專業(yè)技術(shù)，通過一抗、二抗、DNA滾環(huán)復制，可將蛋白信號放大1000倍，實現(xiàn)單分子級別的靈敏度。即便是微量樣本、微弱互作、極罕見的低豐度表達，也能在內(nèi)源水平可視化研究蛋白的互作、定位和定量。更關(guān)鍵的是該技術(shù)操作簡單，僅需一天！

我們首先需要自己準備一對識別A和B的不同來源的一抗，例如鼠抗A，兔抗B；試劑盒里有一對二抗探針，這個探針就是在二抗上加了一段寡核苷酸鏈；還有成鏈寡核苷酸，用于滾環(huán)擴增的DNA酶，以及最后產(chǎn)生信號的熒光探針。

使用Duolink?試劑，無需改造細胞或蛋白，只要使用抗體即可開展實驗，實驗步驟迅速，當天即可完成，Duolink?應(yīng)用非常廣泛，堪稱蛋白研究的多面手。至今已在腫瘤學、神經(jīng)生物學、免疫學、病毒學、表觀遺傳學、生殖發(fā)育、組織病理學、心血管、代謝等研究領(lǐng)域進行了廣泛報道。

總結(jié)來說，DuolinkTM技術(shù)主要有以下特點：

1.Duolink?可以讓你對穩(wěn)定、微弱及瞬時的內(nèi)源性蛋白質(zhì)相互作用進行可視化研究。

2.Duolink?技術(shù)使您能夠在固定的細胞和組織中，對內(nèi)源性修飾過程進行可視化的研究。

3.使用Duolink?可以讓你對單個蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間相互作用的內(nèi)源表達水平進行檢測。

此外，如需在同一個樣品中分析多個蛋白質(zhì)事件，可選用多色multicolor Duolink試劑盒， multicolor最多可在同一個樣本中檢測4個蛋白質(zhì)事件。

單色或多色Duolink?結(jié)果可使用Imagetool軟件進行信號統(tǒng)計，也可結(jié)合流式細胞術(shù)進行精確定量。結(jié)果真實可靠，檢測靈敏方便，技術(shù)新穎又有說服力，簡直是你發(fā)表文章的利器。