新物體識別是一種廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)和認知研究的行為學(xué)測試方法，通過量化動物對新舊物體的探索偏好來評估其記憶能力。主要用于評估阿爾茨海默癥等病模型的記憶障礙，以及藥或基因干預(yù)對認知功能的影響。

一、實驗原理與核心參數(shù)

認知檢測機制：利用動物自發(fā)探索新物體的本能，通過對比其對熟悉物體（Familiar Object）與新物體（Novel Object）的探索時間差異，評估短期/長期記憶能力。

關(guān)鍵指標：

認知指數(shù)（RI）：RI = 新物體探索時間 / (新物體探索時間 + 熟悉物體探索時間) × 100%。

正常判斷標準：健康小鼠RI > 65%（RI < 50%提示認知障礙）。

二、標準化操作流程

階段1：適應(yīng)性準備

動物篩選

選用同齡同性小鼠（推薦12-14周齡C57BL/6J），每組≥8只；阿爾茨海默癥模型可用APP/PS1轉(zhuǎn)基因鼠。

環(huán)境適應(yīng)：測試前24小時將動物移至實驗房間，適應(yīng)光線、氣味及噪音。

設(shè)備與物體準備

實驗箱規(guī)格：

小鼠：25×25×40cm透明亞克力箱體，避免反光材質(zhì)。

光源：20-30勒克斯漫反射照明（避免直射強光）。

物體要求：

材質(zhì)：無味塑料/陶瓷/木質(zhì)，小鼠適用直徑3-4cm。

固定：雙面膠加固防止移動或傾倒。

階段2：訓(xùn)練期（熟悉期）

放置兩個相同物體（A與B）于箱內(nèi)，距側(cè)壁10cm，對稱擺放。

將小鼠背向物體放入箱體中心，自由探索5分鐘。

記錄雙側(cè)物體總探索時間（鼻尖接觸物體或距離≤2cm視為探索）。

階段3：測試期（記憶檢測）

延遲時間控制：

短期記憶：訓(xùn)練后1小時測試。

長期記憶：24小時或更久（可延至7天）。

物體替換：將一側(cè)物體替換為外形/紋理差異顯著的新物體（如柱狀→錐狀）。

記錄5分鐘內(nèi)對新/舊物體的探索時間，計算RI指數(shù)。

三、注意事項

環(huán)境控制

氣味去除：每次測試前用肥皂水+70%乙醇雙重清潔箱體及物體，除殘留氣味。

物理參數(shù)：維持溫度22±1℃、濕度50±5%、背景噪音<40分貝。

動物管理

應(yīng)激：提前3天每日撫摸小鼠1分鐘，減少操作焦慮。

性別特異性：雌鼠需處于非發(fā)情期（避免波動干擾探索行為）。

陌生鼠配對：同批次、同性別、體重差異<10%，防止攻擊行為。

數(shù)據(jù)采集規(guī)范

行為判定：

探索：鼻尖指向物體或主動嗅探。

無效行為：倚靠物體休息、爬過物體未嗅探。

視頻分析：

使用專業(yè)軟件（如ANY-maze），分辨率≥1080p，幀率≥30fps。

人工復(fù)核軟件識別結(jié)果，校正誤判的探索行為。