師姐,制備 cDNA 太折磨了!裂解細(xì)胞、提 RNA、逆轉(zhuǎn)錄三步下來,樣本不是降解就是污染,反復(fù)離心換管,折騰半天產(chǎn)量還低,細(xì)胞快用完了也沒拿到像樣的 cDNA!
傳統(tǒng)方法確實(shí)步驟多。你試試 EZBioscience? 的細(xì)胞到 cDNA 一步法試劑盒?不用單獨(dú)提 RNA,直接從細(xì)胞中得到 cDNA,減少降解和污染。最快 25 分鐘完成,最低 1,000 個(gè)細(xì)胞就能做,適合樣本量少和高通量的基因表達(dá)檢測實(shí)驗(yàn),比 TRIzol 法又快又穩(wěn)又靈敏!
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細(xì)胞到 cDNA 一步法升級(jí)版試劑盒
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產(chǎn)品特點(diǎn):
簡單快速:無需 RNA 提取,僅需兩步操作(5 分鐘細(xì)胞裂解釋放 RNA,15 分鐘逆轉(zhuǎn)錄得到 cDNA),即可在 25 分鐘內(nèi)完成從細(xì)胞中得到 cDNA 的整個(gè)實(shí)驗(yàn)。且得到的細(xì)胞裂解產(chǎn)物和 cDNA 均可凍存后重復(fù)使用。
穩(wěn)定且高度可重復(fù):在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,總 RNA 得以完美保留,從而獲得穩(wěn)定且高度可重復(fù)的結(jié)果。
高靈敏度:每個(gè)樣品的檢測下限僅為 1,000 個(gè)細(xì)胞。
基因組殘留少:該試劑盒中包含的 gDNA Remover 可有效去除基因組 DNA。
節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本:傳統(tǒng)的 TRIzol 方法,通常需要使用 6 孔板進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn);使用 EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS 僅需使用 24、48、96 或 384 孔板,便于進(jìn)行高通量實(shí)驗(yàn),且培養(yǎng)基、血清以及生長因子等的用量可以減少到傳統(tǒng)方法的 1 / 4 及以下,在顯著提高實(shí)驗(yàn)效率的同時(shí),大大節(jié)省了實(shí)驗(yàn)的試劑、耗材等物料成本。特別適用于小分子及藥物的高通量篩選實(shí)驗(yàn)。
安全無毒:不使用苯酚、氯仿、異丙醇、DEPC 水等對(duì)身體有害的物質(zhì)。
操作流程:
細(xì)胞通過搖床裂解或者吹打裂解在裂解液中充分釋放 RNA,之后通過 gDNA Remover 去除基因組 DNA,最后進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)即可獲得高質(zhì)量的 cDNA,可作為模板進(jìn)行 qPCR 實(shí)驗(yàn)。
代表性實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
用 5 對(duì)引物分別對(duì)本試劑盒和 TRlzol + 逆轉(zhuǎn)錄法合成的 cDNA 細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí) qPCR 測試。
由上圖可見,EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS 和 TRizol + 逆轉(zhuǎn)錄法的結(jié)果高度一致(線性相關(guān)系數(shù) R2 = 0.9973),這表明本試劑盒可以完全取代 TRlzol + 逆轉(zhuǎn)錄法從細(xì)胞制備 cDNA。自 2016 年問世以來,本產(chǎn)品已被多篇學(xué)術(shù)論文引用,在權(quán)威期刊發(fā)表。
目前正在使用 EZBioscience? RNA 提取相關(guān)試劑盒的單位:中科院上海生化細(xì)胞所、中科院上海藥物所、中科院上海巴斯德所、中科院上海營養(yǎng)與健康所、中科院廣州生物健康院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)、中山大學(xué)、同濟(jì)大學(xué)、華東師范大學(xué)、上??萍即髮W(xué)、上海中醫(yī)藥大學(xué)、南方醫(yī)科大學(xué)、天津醫(yī)科大學(xué)、廣州醫(yī)科大學(xué)、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)、瑞金醫(yī)院、中山醫(yī)院、華山醫(yī)院、仁濟(jì)醫(yī)院、上海紅房子醫(yī)院、復(fù)旦附屬眼耳鼻喉醫(yī)院、交大附屬六院、交大附屬九院、孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院、國家兒童醫(yī)學(xué)中心、國家呼吸醫(yī)學(xué)中心等等。
另外,EZBioscience? 細(xì)胞到 cDNA 一步試劑盒關(guān)聯(lián)產(chǎn)品如下,歡迎了解選購。
高效快速彩色 qPCR Mix
A0012-R2
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內(nèi)容策劃:沈佳鈺
內(nèi)容審核:朱超敏
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