近日，徐州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院王文世教授、郭虹波教授團(tuán)隊(duì)在Journal of Virology在線發(fā)表題為“Multimodal characterization of the responsiveness of eight hepatitis D virus genotype isolates to interferon-alpha treatment”的研究論文。該研究通過構(gòu)建多維度體外細(xì)胞模型，系統(tǒng)解析了干擾素-α（IFN-α）家族對(duì)全部8種基因型丁型肝炎病毒的抗病毒效應(yīng)及影響因素，為優(yōu)化基于IFN-α的丁肝治療方案提供關(guān)鍵理論支撐。

丁肝病毒（HDV）與乙肝病毒（HBV）共感染是目前已知最嚴(yán)重的慢性病毒性肝炎，可顯著加速肝纖維化、肝硬化和肝癌的進(jìn)展。目前，全球約有1200萬-7200萬慢性HDV感染者，然而臨床治療手段極為有限。IFN-α2a是過去數(shù)十年臨床中唯一推薦應(yīng)用的治療藥物，但僅對(duì)部分患者有效。值得注意的是，人體內(nèi)已發(fā)現(xiàn)10余種IFN-α亞型，不同亞型對(duì)病毒的抑制活性存在顯著差異；同時(shí)HDV已發(fā)現(xiàn)8種基因型，各基因型在地理分布、復(fù)制能力及致病性上截然不同。然而目前尚未明確不同IFN-α亞型對(duì)8種HDV基因型的抗病毒效果及關(guān)鍵影響因素，這極大限制了 基于IFN-α的抗丁肝治療方案的優(yōu)化。

針對(duì)這一關(guān)鍵科學(xué)問題，團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了“ 新發(fā)感染-細(xì)胞分裂-靜息細(xì)胞”三種體外模型，全面模擬HDV的三種主要生存狀態(tài)，系統(tǒng)評(píng)估了IFN-α2a及其他IFN-α亞型的抗HDV活性：

新發(fā)感染與細(xì)胞分裂階段：在HDV新發(fā)感染和細(xì)胞分裂介導(dǎo)的病毒擴(kuò)散階段，IFN-α2a對(duì)8種HDV基因型均表現(xiàn)出劑量依賴性抑制作用，但抑制效率存在顯著基因型差異。其中，HDV-2、HDV-8、HDV-5對(duì)IFN-α2a最為敏感，而HDV-1、HDV-6敏感性最低，這與臨床觀察到的“HDV-5患者IFN-α2a治療預(yù)后優(yōu)于HDV-1患者”等現(xiàn)象高度吻合，為臨床基因型導(dǎo)向的治療方案提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

靜息細(xì)胞中HDV展現(xiàn)“耐藥特性”：當(dāng)HDV處于靜息肝細(xì)胞（非分裂狀態(tài)肝細(xì)胞）中時(shí)，IFN-α2a無法有效抑制病毒復(fù)制，即使使用TLR7/8激動(dòng)劑激活外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）產(chǎn)生的“干擾素-細(xì)胞因子混合物”（模擬體內(nèi)天然免疫應(yīng)答），也難以抑制病毒復(fù)制。這一發(fā)現(xiàn)為解釋HDV慢性持續(xù)感染和治療后復(fù)發(fā)提供了新的理論視角，也提示針對(duì)靜息細(xì)胞中HDV的藥物研發(fā)是未來根治HDV的關(guān)鍵方向。

ADAR1 p150是調(diào)控IFN-α抗HDV效果的關(guān)鍵效應(yīng)分子：進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，宿主蛋白ADAR1（RNA腺苷脫氨酶1）的兩個(gè)亞型中，ADAR1 p110和p150均能通過促進(jìn)病毒L-HDAg蛋白生成，從而抑制HDV復(fù)制，發(fā)揮抗病毒作用。但僅IFN-α誘導(dǎo)產(chǎn)生的ADAR1 p150能在新發(fā)感染和細(xì)胞分裂階段“增強(qiáng)IFN-α的抗HDV效果”，而在靜息細(xì)胞中無此作用。這一發(fā)現(xiàn)明確了ADAR1 p150是IFN-α抗HDV的關(guān)鍵效應(yīng)分子。

IFN-α家族對(duì)HDV 1-8型的抗病毒效應(yīng)：通過對(duì)12種IFN-α亞型的抗HDV活性篩選，團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)IFN-α10、IFN-α14與臨床常用的IFN-α2a的抗HDV效果最強(qiáng)，其抑制HDV的效率是IFN-α1、IFN-α7等弱活性亞型的100倍以上。機(jī)制上，這三種強(qiáng)抗病毒活性亞型能更高效激活JAK-STAT信號(hào)通路，誘導(dǎo)更高水平的抗病毒干擾素刺激基因（ISGs）表達(dá)。更重要的是，IFN-α10、IFN-α14與HDV進(jìn)入抑制劑Bulevirtide聯(lián)合使用時(shí)，展現(xiàn)出顯著的協(xié)同抑制效應(yīng)，為開發(fā)“高效低毒”的聯(lián)合治療方案提供了潛在選擇。

Figure：Determination of the synergistic effect in combination between IFN-α subtypes and BLV

該研究利用構(gòu)建的多細(xì)胞模型體系揭示了IFN-α亞型對(duì)8種HDV基因型的抗病毒活性差異，明確了參與覺得IFN-α抗HDV效果的多重關(guān)鍵因素（包括HDV基因型、ADAR1 p150的水平、IFN-α亞型以及HDV不同的生存策略），為優(yōu)化基于IFN-α的臨床治療方案提供了多維度參考。

徐州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院講師丁奕博、博士研究生李球棣為論文共同第一作者，王文世教授、郭虹波教授為論文共同通訊作者。同時(shí)特別感謝德國海德堡大學(xué)醫(yī)院Stephan Urban教授、南方科技大學(xué)張振鋒教授、上海市公共衛(wèi)生臨床中心李鋒研究員等參與本項(xiàng)研究，為本研究的完成提供大力支持。該研究得到國家自然科學(xué)基金、江蘇省衛(wèi)健委重點(diǎn)項(xiàng)目等基金資助。